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作者：陈尚琛;董宁宁;高嘉溪;谈晓梅;李娜;罗茂青;王诗诗;朱雯琪;邓应坤;庞帅赛;刘光清;孟春春;
单位：中国农业科学院上海兽医研究所伴侣动物生物安全风险预警与防控技术团队;新疆农业大学动物医学学院;
摘要：本研究旨在筛选并鉴定猫杯状病毒（Feline calicivirus, FCV）NS2蛋白与宿主细胞蛋白的相互作用，探讨NS2在病毒复制和宿主免疫逃逸中的潜在功能。采用FCV的NS2真核表达质粒转染CRFK细胞，同时设立空载体对照组，每组各三个样本于转染后24h收样进行LC-MS/MS质谱分析，筛选与NS2相互作用的差异蛋白。通过生物信息学分析筛选出与NS2可能存在高度相互作用的宿主蛋白，采用免疫共沉淀（Co-IP）逐一验证宿主蛋白与NS2蛋白之间的相互作用。质谱分析筛选出617个可能与NS2存在特异互作的蛋白。通过GO和KEGG分析，发现差异蛋白主要参与细胞周期调控、DNA代谢、核糖体生物发生等生物学过程。结合FCV在胞内的生活史初步判定HEXIM1、SEC62、FKBP11、RPS15A和DDX20这五个蛋白与NS2蛋白最有可能发生相互作用。最后通过Co-IP实验确认HEXIM1、FKBP11均与NS2之间存在相互作用。本研究通过质谱和免疫共沉淀技术筛选并验证了与NS2发生互作的宿主蛋白，为深入解析其在FCV增殖中的作用提供了新研究方向。
关键词：猫杯状病毒;;NS2;;免疫共沉淀技术;;质谱分析
基金资助：2023年度“农科英才”工程（项目号：农科院人[2024]2号），题目：中国农业科学院青年英才培育计划~~
