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作者：李红蕾;赵茹钰;徐文韬;
单位：南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院;
摘要：目的：观察“醒脑开窍”针刺法对缺血性脑卒中大鼠局部血管舒张的影响，探讨针刺对缺血性脑损伤保护作用的机制。方法：将80只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组、锌螯合剂组，每组20只。除假手术组外，其余各组大鼠均采用改良的Longa线栓法建立大脑中动脉栓塞模型；假手术组仅进行钝性分离，不插入线栓。针刺组行“醒脑开窍”针刺法干预，穴取双侧“内关”及“水沟”，留针30 min，每日1次，连续干预7 d。锌螯合剂组于造模前30 min腹腔注射锌螯合剂TPEN(15 mg/kg)。于造模后2 h及造模后7 d评定神经行为学评分；于造模前、造模后2 h及造模后7 d采用激光散斑测量大鼠右侧大脑皮层缺血区血管管径，计算血管管径扩缩比；造模后7 d，采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法检测大鼠脑梗死体积百分比，FLOUZin-3荧光探针检测大鼠右侧大脑皮层缺血区锌离子（Zn~(2+)）水平，Western blot法和实时荧光定量PCR法检测大鼠右侧大脑皮层缺血区血管舒张相关因子瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)、降钙素基因相关肽（CGRP）蛋白和mRNA表达，钙测试盒检测大鼠右侧大脑皮层缺血区钙离子（Ca~(2+)）含量。结果：造模后7 d，与假手术组比较，模型组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积百分比、Zn~(2+)水平和Ca~(2+)含量均升高（P<0.05），血管管径扩缩比差异无统计学意义（P>0.05）,TRPA1、CGRP蛋白和mRNA表达降低（P<0.05）。与模型组比较，针刺组与锌螯合剂组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积百分比、Zn~(2+)水平和Ca~(2+)含量降低（P<0.05），血管管径扩缩比升高（P<0.05）,TRPA1、CGRP蛋白和mRNA表达升高（P<0.05）。与锌螯合剂组比较，针刺组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积百分比升高（P<0.05），血管管径扩缩比、Zn~(2+)水平、TRPA1蛋白和mRNA表达、CGRP蛋白和mRNA表达、Ca~(2+)含量差异无统计学意义（P>0.05）。结论：“醒脑开窍”针刺法可有效舒张脑血管以减轻缺血性脑损伤，其机制可能与降低游离Zn~(2+)水平，激活TRPA1通道促进Ca~(2+)内流，从而释放CGRP诱导脑血管舒张有关。
关键词：缺血性脑卒中;;“醒脑开窍”针刺法;;Zn~(2+);;血管舒张;;TRPA1通道
基金资助：国家自然科学基金资助项目：82104993、82074525
