来源：期刊VIP网 时间：
作者：杨翟璨;刘密;陆鹏徽;周竞颖;徐璇;王璐瑶;刘琼;
单位：湖南中医药大学针灸推拿与康复学院;
摘要：目的：观察艾灸“天枢”对克罗恩病（CD）小鼠肠道炎症损伤的影响，探讨肿瘤抑制因子p53调控溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽（GSH）/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)轴对CD小鼠肠道铁死亡脂质过氧化的影响。方法：将50只SPF级C57BL/6野生型小鼠随机分为空白组10只、造模组40只。造模组采用蒸馏水配制成浓度为2%的葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液制备CD小鼠模型。空白组随机选1只、造模组随机选4只进行模型比较评价，确认模型制备成功后，造模组分为模型组、艾灸组、激艾组、抑制剂组，每组9只，空白组9只。艾灸组小鼠以细艾条灸双侧“天枢”15 min，每天1次，连续干预14 d；激艾组艾灸干预方法同艾灸组，同时于“天枢”穴周围皮下注射激动剂RITA(10 mg/kg)，每天1次，连续注射14 d；抑制剂组于“天枢”穴周围皮下注射抑制剂Pifithrin-α(2.2 mg/kg)，每天1次，连续注射14 d。干预前与干预后，观察各组小鼠一般情况、体质量和疾病活动指数（DAI）评分。干预后，HE染色法观察小鼠结肠组织形态；ELISA法检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素（IL）-1β、IL-17和IL-6含量，以及小鼠结肠组织4-羟基壬烯酸（4-HNE）、丙二醛（MDA）、GSH、超氧化物歧化酶（SOD）和亚铁离子（Fe~(2+)）含量；Western blot法检测小鼠结肠组织p53、SLC7A11、GPX4蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠毛发干枯，蜷缩聚集，反应迟钝，摄食量下降，可见笼盒内及小鼠肛周出现黏液脓血，大便疏松呈糊状，粪便隐血试验呈阳性，小鼠体质量降低（P<0.05）,DAI评分升高（P<0.05）；小鼠结肠组织的结构完整性被破坏，腺体肿胀，排列混乱，可见大量炎性细胞浸润及肠上皮断裂缺失；血清TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-6含量升高（P<0.05）；结肠组织4-HNE、MDA、Fe~(2+)含量与p53蛋白表达升高（P<0.05）,SOD、GSH含量与SLC7A11、GPX4蛋白表达降低（P<0.05）。与模型组比较，艾灸组、抑制剂组和激艾组小鼠疾病症状缓解，体质量升高（P<0.05）,DAI评分降低（P<0.05）；艾灸组和抑制剂组小鼠结肠组织肠上皮连续性均恢复，肠黏膜呈轻度肿胀，腺体排列较整齐，偶见少量炎性细胞散在分布；激艾组小鼠结肠组织肠黏膜肿胀程度较模型组减轻，但减轻程度不及艾灸组和抑制剂组，肠上皮连续性未恢复；艾灸组和抑制剂组血清TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-6含量降低（P<0.05）；结肠组织4-HNE、MDA、Fe~(2+)含量与p53的蛋白表达降低（P<0.05）,GSH、SOD含量与SLC7A11、GPX4蛋白表达升高（P<0.05）；激艾组血清TNF-α、IL-1β、IL-17含量降低（P<0.05），结肠组织MDA、Fe~(2+)含量和p53蛋白表达降低（P<0.05）,GSH含量和SLC7A11、GPX4蛋白表达升高（P<0.05）。与艾灸组比较，激艾组和抑制剂组血清TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-6含量与结肠组织4-HNE含量、p53蛋白表达均升高（P<0.05），体质量与结肠组织SOD、GSH含量以及SLC7A11、GPX4蛋白表达降低（P<0.05）；激艾组结肠组织MDA、Fe~(2+)含量升高（P<0.05）。与抑制剂组比较，激艾组血清IL-6含量、结肠组织4-HNE、MDA含量和p53蛋白表达升高（P<0.05），体质量与结肠组织SOD、GSH含量以及GPX4蛋白表达降低（P<0.05）。结论：艾灸CD小鼠“天枢”能够减轻肠道炎症，可能是通过下调p53蛋白表达，增强SLC7A11/GSH/GPX4通路活性，减少脂质过氧化物的产生，从而维持肠道铁稳态，减轻结肠组织铁死亡。
关键词：克罗恩病;;艾灸;;铁死亡;;p53;;SLC7A11/GSH/GPX4信号通路
基金资助：国家自然科学基金资助项目：82474662、81774438;; 湖南省教育厅科学研究项目：23A0284;; 湖南省自然科学项目：2023JJ30457;; 湖南省卫生健康高层次人才重大科研专项：R2023141;; 长沙市自然科学基金项目：kq2208183;; 国家中医药管理局2022年青年岐黄学者培养项目：国中医药人教函[2022]256号;; 湖南省科技创新计划项目：2024JK2132、2024RC1061
