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作者：范围;孟庆良;郑福增;周子朋;马俊福;展俊平;谷慧敏;
单位：河南省中医院风湿病科;河南中医药大学骨伤学院;
摘要：目的：探讨痛风汤含药血清对痛风性关节炎巨噬细胞活化和炎症水平的影响及其可能的作用机制。方法：20只雄性SD大鼠随机分为空白对照组和痛风汤组，制备空白血清和痛风汤含药血清。制备痛风炎症细胞模型。实验设空白对照组、模型组、10%空白血清组和不同浓度痛风汤含药血清组，并加入LY294002(PI3K抑制剂)、740 Y-P(PI3K激活剂)进行干预。MTT法检测细胞活力，ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-6、IL-10、NO水平，转录组学分析差异基因，免疫荧光染色法检测细胞中CD68和CD163标志物表达，荧光定量PCR检测TNF-α、iNOS、IL-10、Arg-1 mRNA表达，Western Blot检测PI3K/Akt通路相关蛋白表达。结果：空白对照组与模型组、模型组与痛风汤含药血清组转录差异表达基因的KEGG通路均显著富集于PI3K/Akt信号通路。与空白对照组比较，模型组细胞活力、CD163荧光强度显著降低，TNF-α、IL-6、NO水平和CD68荧光强度显著升高，IL-10、Arg-1 mRNA表达显著降低，TNF-α、iNOS mRNA表达显著升高，p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB P65和核NF-κB P65蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较，LY294002组和不同浓度痛风汤含药血清组细胞活力、CD163荧光强度显著升高，TNF-α、IL-6、NO水平和CD68荧光强度显著降低，IL-10、Arg-1 mRNA表达显著升高，TNF-α、iNOS mRNA表达显著降低，p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB P65和核NF-κB P65蛋白表达显著降低(P<0.01)。与10%痛风汤含药血清组比较，740 Y-P+10%痛风汤含药血清组细胞活力、CD163荧光强度显著降低，TNF-α、IL-6、NO水平和CD68荧光强度显著升高，IL-10、Arg-1 mRNA表达显著降低，TNF-α、iNOS mRNA表达显著升高，p-PI3K、p-Akt、p-NF-κB P65和核NF-κB P65蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论：痛风汤含药血清可抑制GA巨噬细胞M1极化，降低炎症因子水平，其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路有关。
关键词：痛风汤;;巨噬细胞极化;;PI3K/Akt;;痛风性关节炎
基金资助：国家自然科学基金面上项目(81874456);; 河南省中医药科学研究专项课题(2023ZY2089);; 河南省高等学校重点科研项目(22B360006);; 河南省中医药专项重点课题(2024ZY1011);; 国家临床基地课题(2021JDX2123);; 中华中医药学会风湿病分会青年培养计划(202327-009)
