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作者：廖培淇;朱子奇;苏中华;甘富斌;李俊强;陈远才;张龙现;
单位：河南农业大学动物医学院河南省人兽共患病国际联合实验室农业农村部禽类产品质量安全控制重点实验室;西藏自治区动物疫病预防控制中心畜牧总站;林芝市农业农村局动物疫病预防控制中心;
摘要：为建立特异、敏感、快速的边缘无浆体PCR检测方法，以其msp4基因的保守区为靶标设计一对特异性引物。优化PCR反应条件后，进行了敏感性、特异性、重复性试验及临床样品检测。结果显示，所建立的方法能够特异性检测边缘无浆体核酸，而与其他动物常见血液原虫无交叉反应；该方法的检测下限为380 fg/μL，拷贝数为126拷贝/反应；批内、批间试验结果表明，该方法具有良好的重复性和稳定性；对120份牦牛血液临床样本检测结果表明，该方法检测边缘无浆体阳性率为54.1%(65/120)，高于文献报道方法检测结果 37.5%(45/120)，表明该方法具有良好的敏感性和准确性。成功建立了一种敏感、特异、快速的边缘无浆体PCR检测方法，为我国牛无浆体病的流行病学调查和诊断防控提供了技术支撑。
关键词：边缘无浆体;;msp4基因;;PCR;;牛无浆体病
基金资助：国家重点研发计划项目（2023YFD1801200）;; 河南省科技厅动物源重要人兽共患病源头防控措施与关键技术创新项目（231111111500）
