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作者:郭海洋;蔡梦婷;袁红;王涛;包慧芳;翁涵;赵俊芳;付元芳;李平花;李坤;孙普;曹轶梅;赵志荀;卢曾军;白兴文;
单位:中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院甘肃省病原生物学基础学科研究中心国家口蹄疫参考实验室动物疫病防控全国重点实验室;
摘要:高度硫酸化的硫酸乙酰肝素(HS)作为受体分子调控多种病原体的感染,通过分析HS生物合成修饰酶在病毒入侵中的作用,可以鉴定何种酶催化的反应是HS发挥受体功能的关键。N-脱乙酰/N-硫酸化酶1(NDST1)介导HS的N-硫酸化修饰,本研究分析了NDST1对口蹄疫病毒(FMDV)入侵CHO-K1细胞的影响。利用蚀斑试验筛选高效感染CHO-K1细胞的FMDV,构建pLOV-NDST1重组质粒以及设计靶向NDST1的特异性siRNA,通过Western-blot和RT-qPCR分析NDST1过表达以及敲低对FMDV复制、吸附和内化的影响。结果表明,FMDV O/NX/92能够明显感染CHO-K1细胞,NDST1过表达显著促进FMDV O/NX/92在CHO-K1细胞中的复制、吸附和内化,特异性siRNA介导的NDST1敲低显著抑制FMDV O/NX/92在CHO-K1细胞中的复制、吸附和内化。本研究在CHO-K1细胞中证实NDST1催化的N-硫酸化修饰可明显增强FMDV的入侵能力,为HS的受体功能机制解析及抗病毒靶点开发提供了理论依据。
关键词:NDST1;;口蹄疫病毒;;硫酸乙酰肝素;;入侵
基金资助:国家自然科学基金青年科学基金项目(32200136);; 国家重点研发计划项目(2021YFD1800300);; 甘肃省重大科技专项(21ZD3NA001,22ZD6NA001,22ZD6NA012);; 国家生猪技术创新中心项目(NCTIP-XD/C03)