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作者：韩瑞;付磊;尤留超;王梦春;陶政宇;朱家瑶;Adehanom;王鹏雁;储岳峰;蒋建军;
单位：石河子大学动物科技学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;
摘要：为构建猪霍乱沙门菌ΔcrpΔasdΔsopB/C78-2缺失株（ΔCAS）并评价其免疫保护效力，本研究在实验室前期搭建的ΔcrpΔasd/C78-2双基因缺失株（ΔCA）的基础上利用sacB反向筛选系统进一步缺失了sopB基因，并将平衡致死质粒PYA3493电转化ΔCAS，成功构建猪霍乱沙门菌载体重组菌株ΔCAS+PYA3493（ΔCAS+P）。通过对ΔCAS和ΔCAS+P生长特性和遗传稳定性的评估及ΔCAS+P重组菌株对小鼠的致病力及其免疫保护效力的评价，来探究其作为疫苗载体的潜力。结果表明，ΔCAS+P与C78-2相比生长受限，且sopB基因能够稳定缺失。与C78-2相比，ΔCA+P和ΔCAS+P致病力均显著下降，且ΔCAS+P的致病力较ΔCA+P更低。口服或肌肉注射ΔCAS+P均能引起小鼠机体产生较高水平的Ig G抗体，且对于小鼠的免疫保护效率分别为100%和90%，但其免疫的小鼠脏器有部分损伤。这些结果表明，ΔCAS+P对于小鼠具有更低的致病力及良好的保护效力，但其仍有毒力残留，为后续开发猪霍乱沙门菌-异源抗原重组二联苗提供了策略与材料基础，为开发新型猪霍乱沙门菌载体疫苗提供了重要的试验依据。
关键词：猪霍乱沙门菌;;ΔcrpΔasdΔsopB/C78-2缺失株;;平衡致死系统;;致病力;;免疫保护效力
基金资助：“十四五”国家重点研发计划项目（2022YFD1800904）;; 甘肃省重大专项（22ZD6NA001）;; 中国农业科学院科技创新工程项目（CAAS-ASTIP-2021-LVRI）
