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作者：袁佳欣;刘天赐;刘婷婷;刘达一;许磊;周子贺;夏宇;徐彤;李龙飞;
单位：河北北方学院动物科技学院;
摘要：为确定H9N2猪流感病毒（H9N2-SIV）通过瞬时受体电位通道M2(TRPM2)介导肺微血管上皮细胞（PMVEC）铁死亡的分子机制，使用H9N2-SIV接种PMVEC，构建TRPM2-siRNA质粒并转染细胞。用透射电镜观察细胞超微结构，用荧光探针法检测活性氧（ROS）、Ca~(2+)和Fe~(2+)；用生化试剂盒检测丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）含量，并通过荧光定量PCR和Western-blot检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、TRPM2、蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）、活化转录因子4(ATF4)、阳离子转运调控样蛋白1(CHAC1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的m RNA和蛋白表达水平。结果显示，H9N2-SIV感染可诱导细胞铁死亡，敲低TRPM2可以减少细胞内ROS水平，降低Ca~(2+)、Fe~(2+)及MDA含量，GSH水平明显增加；此外，GRP78、PERK、ATF4、CHAC1 m RNA和蛋白表达水平下调，GPX4的m RNA和蛋白表达水平上调。结果表明，H9N2-SIV感染可诱导细胞铁死亡，其可通过激活TRPM2使Ca~(2+)内流增多，进而激活PERK/ATF4/CHAC1信号通路，加速GSH耗竭，抑制GPX4的活性，促进细胞铁死亡。
关键词：H9N2猪流感病毒;;TRPM2;;肺微血管上皮细胞;;铁死亡
基金资助：河北省自然科学基金资助项目（C2025405036,C2023405005）;; 河北省中央引导地方科技发展资金资助项目（236Z6601G）;; 河北北方学院大学生创新训练计划资助项目（202410092020）;; 河北省现代农业产业技术体系肉禽产业创新团队建设专项资助项目（HBCT2024270205）;; 河北省教育厅项目（ZC2025031）
