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作者：刘兵;
单位：商丘职业技术学院;
摘要：为了建立一种牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗体检测方法，本研究对IBRV gD蛋白进行原核表达，以表达蛋白为包被抗原建立检测IBRV抗体的间接ELISA方法。结果显示：gD基因PCR扩增产物约945 bp，构建原核表达载体pET30a-gD，经IPTG诱导表达，Western blot检测显示重组蛋白具有良好的反应活性，以纯化蛋白为包被抗原建立的间接ELISA方法检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛肠道病毒(BEV)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)阳性血清均为阴性，检测IBRV阳性血清的最低抗体检出效价为1∶12 800，与病毒中和试验方法的符合率为96.15%，批内与批间重复性试验的变异系数分别小于5%和8%，检测825份免疫疫苗牛血清样品和514份未免疫疫苗牛血清样品的阳性率分别为90.67%和7.39%。本研究建立的间接ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性、准确性、重复性，为IBRV的临床诊断、流行病学调查、免疫抗体监测、疫苗免疫效果评价等提供了一种简单快速的血清学检测方法。
关键词：牛传染性鼻气管炎病毒;;gD蛋白;;原核表达;;间接ELISA
