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作者:胡一帆;陈玲超;王安铖;李俊波;孟鑫;童武;单同领;于海;孔宁;童光志;郑浩;
单位:中国农业科学院上海兽医研究所;安徽农业大学生命科学院;东北林业大学野生动物学院;
摘要:以非洲猪瘟病毒(ASFV) p30、p54和pK205R蛋白作为检测线,以兔IgG作为质控线,利用葡萄球菌A蛋白(SPA)和乳胶微球偶联作为免疫探针,建立ASFV抗体检测乳胶微球免疫层析方法。用该方法检测非洲猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪德尔塔冠状病毒、猪瘟病毒和猪流感病毒阳性血清。结果显示:除了ASFV阳性血清检测结果为阳性外,其他阳性血清检测结果均为阴性,未发生交叉反应,表明抗体检测试纸条具有较强的特异性;将ASFV阳性血清倍比稀释用于检测试纸条的敏感性,结果显示p30抗体检测试纸条的检出限为1:51 200,pK205R抗体检测试纸条的检出限为1:12 800,p54抗体检测试纸条的检出限为1:6400,表明3种抗体检测试纸条具有较高的灵敏度;分别用ASFV抗体检测试纸条和商品化ASFV阻断ELISA抗体检测试剂盒对63份临床猪血清样品进行检测,结果显示p30抗体检测试纸条的符合率为96.8%,p54和pK205R抗体检测试纸条的符合率为100%;将室温存放3个月的抗体检测试纸条取出检测血清样品,结果显示不同保存时间段内的试纸条特异性、敏感性和均一性一致,表明ASFV抗体检测试纸条具有良好的稳定性与重复性。本研究建立的ASFV抗体检测试纸条具有良好的特异性、敏感性及重复性,并且操作简便,可以用于猪场现场检测。
关键词:非洲猪瘟;;乳胶微球;;抗体检测;;试纸条
基金资助:科技创新行动计划项目(20392002500);; 国家重点研发计划项目(2021YFD1801300)