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作者：曹旭东;桑建君;孟宪臣;姜文杰;赵喆泓;谢泉;李拓凡;邵红霞;钱琨;秦爱建;叶建强;万志敏;
单位：扬州大学兽医学院禽类预防医学教育部重点实验室江苏省动物预防医学重点实验室;扬州市邗江区西湖畜牧兽医技术推广服务站;江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;扬州大学农业科技发展研究院(国际联合实验室);教育部农业与农产品安全国际合作联合实验室;
摘要：为研制抗H6禽流感病毒HA蛋白单克隆抗体，本研究利用小鼠适应毒株E-Teal/417(MA E-Teal/417)H6禽流感病毒免疫BALB/c小鼠，利用小鼠杂交瘤细胞技术，经间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制(HI)试验等方法筛选和亚克隆，获得4株没有HI效价的单克隆抗体，分别命名为1D4、4A7、4G2和5E9。IFA结果表明，4株单克隆抗体均能识别转染pDP2002-HA(MA E-Teal/417)质粒的293T细胞中表达的HA蛋白。Western blot试验表明，单克隆抗体4G2和5E9能识别感染MAE-Teal/417病毒的MDCK细胞中表达的HA蛋白。中和试验结果发现，单克隆抗体1D4、4A7和4G2具有一定的体外中和活性，抑制MAE-Teal/417在MDCK细胞中感染和复制。小鼠保护性试验进一步表明，单克隆抗体4A7能提供良好的被动免疫抵抗致死性MAE-Teal/417感染。以上获得的无血凝抑制活性、但具有一定中和活性的抗HA单克隆抗体为H6禽流感病毒HA蛋白新型中和表位解析、疫苗设计及诊断技术开发等提供生物材料。
关键词：H6亚型禽流感病毒;;HA蛋白;;单克隆抗体;;无HI;;中和活性;;保护性
基金资助：江苏省基础研究计划自然科学基金(BK20200922);; 国家自然科学基金(32002262);; 江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)
