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作者：张彦兵;解艺璇;李慧;肖长广;葛菲菲;刘珂;魏建超;李宗杰;邵东华;李蓓蓓;马志永;孙延鸣;邱亚峰;
单位：石河子大学动物科技学院;中国农业科学院上海兽医研究所;上海市动物疫病预防控制中心;
摘要：本研究旨在利用PRRSV Nsp2合成肽进行多克隆抗体的制备，并分析了该抗体的特性。应用生物信息学技术预测获得PRRSV非结构蛋白Nsp2的抗原肽序列，并通过化学合成的方法获得抗原肽，将其与KLH载体蛋白进行偶联；随后，将偶联好的抗原肽与弗氏佐剂混合，通过对新西兰大白兔进行免疫获得的血清即为针对Nsp2的多克隆抗体；最后，利用ELISA、Western blot及IFA对多克隆抗体的特性进行分析。研究结果显示：ELISA检测该多克隆抗体的效价超过10~5；Western blot检测可以特异性检测到细胞过表达和不同毒株病毒感染的Nsp2蛋白；IFA检测分析得出，该多克隆抗体可有效地区分病毒感染和未感染的样品。此外，PRRSV Nsp2合成肽多克隆抗体还可以应用于不同毒株PRRSV感染样品的检测，这为进一步研究PRRSV Nsp2的功能提供了一个有效的工具。
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒;;合成肽;;多克隆抗体;;非结构蛋白2
基金资助：上海市科技兴农项目(沪农科推字(2020)第1-4号);; 上海市自然科学基金(22ZR1475900);; 国家自然基金(32273024);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费(2020JB04)
