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中国动物传染病学报2025年第05期:鸡TRIM32的序列分析及功能初步研究

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作者:黄心钰;张俊生;卢军;张淼湘;林宏文;黄小武;焦培荣;郭剑英;

单位:华南农业大学兽医学院广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室;柳州市动物疫病预防控制中心;通辽市扎鲁特旗动物疫病预防控制中心;

摘要:本研究克隆鸡TRIM32(ChTRIM32)基因序列,分析其基因序列及其与不同物种TRIM32基因的同源性和遗传演化关系,预测其结构域及蛋白质二级结构,表达鸡TRIM32蛋白,并探究鸡TRIM32在天然免疫信号通路中的作用。试验结果表明:鸡TRIM32基因开放阅读框为1944 bp,编码647个氨基酸,其蛋白质分子质量约为71.84 kDa;鸡TRIM32蛋白包含1个N端RING-HC结构域、1个B-box1结构域和6个重复的C端NHL结构;鸡TRIM32与火鸡、美洲雕、天鹅、枭鹦、鸿雁、绿头鸭、野猪、人、家鼠、狗、水牛、斑马鱼TRIM32的氨基酸序列同源性分别为97.2%、92.6%、91.9%、91.7%、91.6%、88.8%、75.0%、74.8%、74.7%、74.2%、74.0%、63.9%;鸡TRIM32与其他鸟类TRIM32的亲缘关系最近,与哺乳动物TRIM32的亲缘关系较远,与鱼类TRIM32的亲缘关系最远;鸡TRIM32蛋白质二级结构包含无规则卷曲(38.64%)、α-螺旋(29.37%)、延伸链(22.87%)、β-转角(9.12%);构建pCAGGS-ChTRIM32真核表达质粒;H5N1亚型禽流感病毒(DK212株)感染DF1细胞后,鸡TRIM32基因及其他抗病毒基因(IFN-β、IL-6、OAS、Mx)表达水平上调;过表达鸡TRIM32能增强鸡STING对IFN-β启动子的激活作用。本文成功鉴定并克隆了鸡TRIM32基因,预测了鸡TRIM32蛋白的结构域与二级结构,并研究了鸡TRIM32在天然免疫信号通路中的功能,为进一步探究鸡TRIM32在鸡抗病毒天然免疫信号通路中的作用奠定了基础。

关键词:鸡TRIM32基因;;序列分析;;天然免疫信号通路

基金资助:国家重点研发计划项目(2021YFD1800202);; 国家自然科学基金项目(32072844、31872497)