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作者：邢文文;李梦轩;齐南南;刘吉英;
单位：江苏科技大学生物技术学院;
摘要：YY1(Yin-Yang1,YY1)作为重要的转录因子对基因表达调控起到重要的作用。本研究旨在克隆猪YY1基因CDS区序列，利用生物信息学软件分析猪YY1基因编码蛋白的特性和功能。利用免疫荧光检测YY1在猪卵泡颗粒细胞中的定位；利用同源重组构建YY1真核表达载体，通过qRT-PCR及Western Blot(WB)检测YY1过表达载体在猪原代卵泡颗粒细胞中的表达效率。本研究成功克隆了猪YY1基因全长CDS区，生物信息学分析结果表明猪YY1蛋白由411个氨基酸组成，相对分子质量为44.3 kDa，为亲水性与酸性蛋白，无跨膜结构域与信号肽，二级结构主要含有α-螺旋（16.06%）、延伸链（19.71%）、β-转角（7.54%）和无规则卷曲（56.69%）,YY1主要定位于细胞核，共含39个潜在的磷酸化位点，互作蛋白有EP300、E2H2、HDAC1、HDAC2等。免疫荧光检测发现YY1主要在猪原代卵泡颗粒细胞的细胞核中表达，qPCR和Western Blot检测结果显示该真核表达载体在猪原代卵泡颗粒细胞中成功表达。本研究为进一步探究猪转录因子YY1的生物学功能及提高母猪的繁殖率提供了理论依据。
关键词：猪;转录因子YY1;克隆;生物信息学分析;卵巢颗粒细胞;载体构建
基金资助：国家自然科学基金项目（32202674）; 江苏省自然科学基金项目（BK20200994）; 江苏省研究生科研与实践创新计划项目（SJCX＿1980）
