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作者:张伟;李俊辉;潘晓梅;曹剑;唐慧芬;毛丽萍;贺笋;
单位:天康生物制药有限公司;
摘要:选择不同细胞因子和培养基,比较4种培养基和细胞因子对猪骨髓细胞分化为单核巨噬细胞数量和增殖能力的影响,筛选出猪骨髓细胞诱导单核巨噬细胞的最佳培养条件。结果显示,在含10%胎牛血清的DME/F12培养基中添加粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)(40 ng/mL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)(50 ng/mL)能够诱导骨髓细胞诱分化成大量单核巨噬细胞,细胞数量与对照组差异显著(P<0.05),并且诱导细胞中有针对单核巨噬细胞的特异性抗原(CD64)表达,单核巨噬细胞纯度为77.57%左右。诱导后的细胞中检测到针对单核巨噬细胞的特异性Nramp1基因。猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)能够在细胞中大量增殖,与未诱导的骨髓细胞差异显著(P<0.05)。以上结果表明,DME-F12培养基添加GM-CSF和L929细胞上清液能够显著增强猪骨髓细胞诱导分化成单核巨噬细胞的能力,并且能够获得高纯度、高密度、高活率的单核巨噬细胞。
关键词:猪;;骨髓;;单核巨噬细胞;;体外培养
基金资助:兵团科技攻关项目(2023AB009-03);; 自治区“天山英才”培养计划青年拔尖人才项目(2023TSYCJC0029)