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作者：劳梦琴;刘瑞琳;陈鹏飞;黄世静;于家荣;朱钧锐;孙祁;虞凌雪;高飞;姜一峰;童武;刘长龙;李丽薇;于海;童光志;周艳君;
单位：中国农业科学院上海兽医研究所;内蒙古农业大学兽医学院;
摘要：猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪流行性腹泻(PED)是当前对养猪业影响较大的两种重要传染病，为了开发可同时针对这两种疫病的疫苗，本研究以PRRSV HuN4-F112活疫苗株为载体，将PEDV S蛋白中可诱导产生中和抗体的抗原区域进行优化和组合，命名为SNE，利用反向遗传操作技术将其引入至HuN4-F112株基因组中，构建了含有SNE的PRRSV全长cDNA克隆pHuN4-F112-SNE，通过病毒拯救获得了重组病毒rHuN4-F112-SNE株，经过对重组病毒引入基因和表达蛋白的鉴定，证实获得的重组病毒rHuN4-F112-SNE能够正确表达PEDV S蛋白优势抗原区域，其生物学特性与亲本毒株相似。将该重组病毒连续传至30代，引入的SNE基因均能获得稳定表达，且不影响亲本毒复制和自身蛋白的表达，表明重组病毒rHuN4-F112-SNE中引入的SNE基因可稳定遗传，研究结果为后续评价rHuN4-F112-SNE作为二价基因工程活载体疫苗的有效性奠定了基础。
关键词：PEDV;;S蛋白;;PRRSV;;重组病毒
基金资助：上海市科技兴农项目(2020-02-08-00-08-F01465);; 国家自然科学基金(32072861);; 上海市自然科学基金项目(20ZR1469600);; 国家生猪现代产业技术体系专项(CARS-35)
