我们的服务符合学术规范和道德
专业 高端让您使用时没有后顾之忧

中国动物传染病学报2025年第01期:盖塔病毒TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

来源:期刊VIP网 时间:


作者:顾志刚;郭洁真;王子涵;孙彤;陈鸿军;孙竹筠;陈丹清;

单位:江苏省常州市武进区畜牧兽医管理服务中心;中国农业科学院上海兽医研究所;

摘要:盖塔病毒(GETV)是一种在我国广泛分布的虫媒病毒,可通过蚊虫传播感染人畜,导致猪、马等动物出现发热、出疹及淋巴结肿大等症状,可致妊娠母猪流产或死胎。目前尚无特效治疗方式。本研究根据GenBank公布的盖塔病毒nsP1基因序列,设计3组引物探针,筛选出最佳的引物探针,建立一种灵敏度高、特异性强的针对盖塔病毒的TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR检测方法。对该方法进行敏感性、特异性、重复性试验和临床样品检测。标准曲线Ct值与相应质粒标准品浓度存在良好的线性关系,相关系数(R~2)为0.9989;对含GETV基因的重组质粒pCDNA3.1-nsP1体外转录RNA进行敏感性试验,最低检出限达10 copies,是普通 RT-PCR 方法的1000倍,敏感性高;与PRRSV、CSFV与PEDV的核酸不发生交叉反应,特异性好;变异系数小于2%,重复性好。本研究建立了一种敏感、特异的GETV检测方法,对GETV的快速诊断具有重要意义。

关键词:盖塔病毒;;nsP1;;TaqMan探针;;实时荧光定量RT-PCR

基金资助:上海市2020年度“科技创新行动计划”实验动物研究领域项目(20140900300);; 2021—2022年增补常州市现代农业产业技术体系建设项目