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作者：张郁熙;李犇;谢沛璇;杨彦;马天帅;兰卓;邱鸿宇;高俊峰;王春仁;
单位：黑龙江八一农垦大学动物科技学院/大庆市动物源性人兽共患病防控重点实验室;桦南县农业农村局动物疫病预防控制中心;
摘要：为了对采自黑龙江林蛙(Rana amurensis)和黑龙江泥鳅(Misgurnus mohoity)肠道中的线虫进行种类鉴定，试验先对虫体进行形态学观察，然后提取虫体总DNA,利用PCR方法对其核糖体ITS序列进行扩增、克隆和测序，再进行序列相似性分析和遗传进化分析。结果表明：黑龙江林蛙肠道中分离的虫体粗壮，体长为5.4～6.2 mm;体表具有细小横纹；口孔具有两个三叶形的侧唇，无中间唇；食管呈长圆筒形，分为前短肌肉和后长腺体两部分；咽部较短；神经环位于食管的2/5处；排泄孔开口于神经环的稍后部；尾部短粗，肛门位于虫体尾部腹面。从黑龙江泥鳅肠道分离的虫体与从黑龙江林蛙肠道中分离出的虫体相似，但相对较小，体长仅为1.0～1.2 mm。基于这些形态特征，初步鉴定分离的虫体为尖旋线虫幼虫。通过分子生物学方法获得的林蛙源和泥鳅源虫体ITS序列长度均为750 bp,与GenBank中黑斑蛙源日本尖旋线虫(KF5303235)ITS序列的相似性为99.7%和99.4%;基于ITS基因序列的遗传进化分析显示，林蛙源和泥鳅源虫体聚集在一起，再与黑斑蛙源日本尖旋线虫(KF530325)形成一个分支，最后与其他3种尖旋线虫构成一个大分支。说明从林蛙和泥鳅中分离的线虫为日本尖旋线虫幼虫。
关键词：日本尖旋线虫;;林蛙;;泥鳅;;形态学;;分子生物学;;核糖体ITS
基金资助：国家自然科学基金项目(31972703);; 黑龙江省自然科学基金项目(ZD2022C006)
