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作者:刘光华;史栋梁;王子华;陈露露;陈渤霏;刘丹丹;傅文;
单位:河南中医药大学第一附属医院风湿病科;河南中医药大学骨伤学院;河南中医药大学康复医学院;河南中医药大学医学院;
摘要:目的:观察“疏肝调神”针刺对慢性炎性痛与抑郁共病(CIPDC)大鼠海马铁代谢、抗氧化系统及脂质过氧化相关因子的影响及对海马神经元的保护作用,阐明电针改善CIPDC的作用机制。方法:将48只成年雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组、帕罗西汀组,每组12只。采用左后足掌皮下注射完全弗氏佐剂的方法构建CIPDC模型。造模后15~28 d,电针组大鼠予“印堂”“百会”“合谷”“太冲”干预,每次30 min,每日1次,持续14 d;帕罗西汀组大鼠予帕罗西汀灌胃(10 mg/kg),每日1次,持续14 d。造模后0、7、14、21、28 d采用机械刺激缩足反应阈值(PWMT)和热缩足反射潜伏期(PTWL)评价各组大鼠疼痛样行为;造模后0、14、28 d采用糖水偏好实验、旷场实验、强迫游泳评价各组大鼠抑郁样行为;HE染色观察海马神经元病理形态变化;普鲁士蓝染色观察海马组织铁沉积情况;透射电镜观察海马神经元内线粒体超微结构;亚铁离子(Fe~(2+))比色法检测海马组织Fe~(2+)含量;ELISA法检测海马组织谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;Western blot及实时荧光定量PCR法检测海马组织铁蛋白重链1(FTH1)、铁蛋白轻链(FTL)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、脂氧合酶(LOX)蛋白及mRNA相对表达水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠PWMT、PTWL、蔗糖偏好率、旷场运动总距离、中心区域运动时间均下降(P<0.01),强迫游泳漂浮时间上升(P<0.01);海马组织出现大量黄褐色铁沉积,神经元大量变性坏死、排列紊乱,线粒体皱缩变形、膜密度增加、边界模糊、线粒体嵴减少消失;Fe~(2+)、MDA含量上升(P<0.01),GSH含量下降(P<0.01);FTH1、FTL、SLC7A11、GPX4蛋白及mRNA表达下调(P<0.01),ACSL4、LOX蛋白及mRNA表达上调(P<0.01)。与模型组相比,电针组和帕罗西汀组大鼠PWMT、PTWL、旷场运动总距离、中心区域运动时间、蔗糖偏好率上升(P<0.01,P<0.05),强迫游泳漂浮时间下降(P<0.01);海马组织黄褐色铁沉积减少,神经元形态较为正常、排列较为规则、核仁较为明显,线粒体形态结构较为完整;Fe~(2+)、MDA含量下降(P<0.01),GSH含量上升(P<0.01);FTH1、FTL、SLC7A11、GPX4蛋白及mRNA表达上调(P<0.01,P<0.05),ACSL4、LOX蛋白及mRNA表达下调(P<0.01,P<0.05)。电针组和帕罗西汀组上述各项指标差异均无统计学意义。结论:“疏肝调神”针刺通过促进抗氧化系统活性恢复和铁代谢平衡、减轻脂质过氧化、抑制铁死亡,从而促进海马神经元的修复与重塑,改善CIPDC疾病进程。
关键词:慢性炎性痛;;抑郁;;共病;;“疏肝调神”针刺;;铁死亡;;海马神经元
基金资助:河南省科技研发计划联合基金项目(No.242301420089);; 国家自然科学基金资助项目(No.82305417);; 河南省科技攻关项目(No.232102311217);; 河南省卫健委国家中医临床研究基地科研专项(No.2022JDZX105)