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作者：周娇娇;李静;张倩;明良山;樊启猛;季爱加;黄佳;
单位：江西中医药大学高等研究院/中医基础理论分化发展研究中心/江西省中医病因生物学重点实验室;广州中医药大学中药学院/国际中医药转化医学研究所;江西中医药大学中药资源与民族药研究中心;
摘要：目的：克隆鸢尾Iris tectorum Maxim.糖基转移酶ItUGT476基因，掌握其生物信息学、组织表达和蛋白原核表达等信息。方法：以鸢尾转录组中ItUGT476基因序列设计特异性引物并进行PCR扩增，产物经测序后进行生物信息学分析；通过实时荧光定量PCR检测ItUGT476基因在植物体内各组织的表达情况；利用同源重组技术构建pET-32a(+)-ItUGT476基因重组载体在大肠杆菌中表达蛋白。结果：ItUGT476基因的开放阅读框全长为1 437 bp,编码478个氨基酸。基因ItUGT476的表达量从高至低分别为根茎、叶片、花。进化树分析表明，ItUGT476编码蛋白与已知类黄酮UGTs聚在7-O-UGT分支上。原核表达显示，ItUGT476基因表达出72.10 kDa目的蛋白。结论：该研究从鸢尾中克隆出糖基转移酶基因ItUGT476,为后续该基因的功能表征以及鸢尾类黄酮生物合成途径作用机制的解析奠定必要的研究基础。
关键词：鸢尾;;糖基转移酶;;基因克隆;;蛋白原核表达;;实时荧光定量PCR
基金资助：江西省教育厅科学技术研究项目青年项目(GJJ2200973);; 江西省药物分子设计与评价重点实验室开放基金资助项目(JKLDE-KF-2301);; 江西中医药大学博士科研启动基金项目(2022BSZR001);; 江西省卫生健康委员会科技计划项目(202311138)
