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作者:谭伟强;刘丽;刘旭东;魏业煌;龚晓倩;王蓉蓉;
单位:广西中医药大学研究生院;广西中医药大学附属瑞康医院肝病科;
摘要:目的:探究祛湿活血方对游离脂肪酸(FFA)诱导的HepG2细胞脂代谢紊乱的调控作用及其分子机制。方法:采用体外细胞实验,利用CCK-8法测定不同浓度祛湿活血方含药血清对HepG2细胞活性的影响以选定适宜浓度进行后续实验。随后使用250μmol/L棕榈酸钠溶液联合500μmol/L油酸钠处理24 h诱导建立脂肪肝细胞模型,并给予不同浓度祛湿活血方含药血清干预24 h。通过油红O染色法和脂质荧光染色法观察细胞内脂滴积聚情况;采用GPO-PAP酶法检测细胞内TC、TG水平;运用免疫荧光染色、qRT-PCR、Western Blot检测细胞内脂质代谢相关基因和蛋白的表达。结果:祛湿活血方可显著改善FFA诱导的HepG2细胞脂质沉积,显著降低细胞内TC、TG含量,降低PI3K、AKT、SREBP1c、FASN、ACC1 mRNA和蛋白及p-PI3K、p-AKT、SREBP1c、FASN、ACC1蛋白表达(P<0.05)。结论:祛湿活血方含药血清能显著改善NAFLD细胞模型的脂质代谢,其机制可能与抑制PI3K-AKT-脂代谢通路有关。
关键词:祛湿活血方;;非酒精性脂肪性肝病;;PI3K;;AKT;;脂代谢;;作用机制
基金资助:国家自然科学基金项目(82160837;82560866);; 2022年广西(青年)岐黄学者培养项目;; 广西研究生教育创新计划项目(YCBZ2025189);; 全国中医临床优秀人才研修项目(国中医药人教函[2022]1号)