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作者：陈小玲;卓尚归;麦喆钘;王耿;姚耿圳;黄曼婷;
单位：广州中医药大学第二临床医学院;广州中医药大学附属中山中医院/中山市中医院;广州中医药大学第二附属医院/广东省中医院;
摘要：目的：探讨调脾护心方对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞泡沫化和焦亡的作用及机制。方法：体外培养人单核-巨噬细胞系THP-1,使用ox-LDL刺激诱导使其成为泡沫细胞，并通过噻唑蓝(MTT)比色法确定调脾护心方对巨噬细胞适当给药浓度后，使用不同浓度调脾护心方进行干预。油红O染色观察细胞内脂质沉积，酶法测定细胞内胆固醇水平，Western Blot检测巨噬细胞ABCA1、ABCG1、NLRP3、GSDMD、IL-1β、LC3、P62、p-AKT、p-mTOR蛋白表达，自噬双标腺病毒检测自噬流。利用自噬抑制剂3-MA抑制细胞自噬，观察调脾护心方是否通过调控自噬抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化和焦亡。结果：调脾护心方(10～100 mg/L)对巨噬细胞无毒性。与模型组比较，调脾护心方能减少巨噬细胞中脂质沉积和TC、CE的含量，上调ABCA1、ABCG1蛋白表达，下调NLRP3、Cleaved GSDMD、Mature IL-1β、P62、p-AKT、p-mTOR蛋白表达，升高LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值，并能明显增强自噬流(P<0.05或P<0.01)。3-MA可逆转调脾护心方的作用(P<0.05或P<0.01)。结论：调脾护心方可能通过抑制AKT/mTOR信号通路来提高巨噬细胞自噬活性，从而促进胆固醇外流来减少泡沫细胞的形成，并抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞焦亡。
关键词：调脾护心方;;巨噬细胞泡沫化;;细胞焦亡;;自噬;;AKT/mTOR信号通路
基金资助：国家自然科学基金项目(82305119);; 广州市科学技术局项目(2023A03J0230);; 广东省中医药局项目(20231369);; 中山市科学技术局项目(2024B1102);; 国家中医药传承发展示范点项目-中山市中医院中医药科研立项(YN2024A002,YN2024B003);; 广州中医药大学校院联合科技创新基金(GZYZS2024U20);; 国家中医药传承发展示范试点项目-院校共建(GZYZS2024XKZ01);; 中山市中医药传承创新发展科研专项(2024B3015)
