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作者：王国威;卓涛;吴思贤;郑全伟;李梦颖;李杰辉;刘建航;
单位：广西中医药大学;广西中医药大学附属北海医院;广西中医药大学第一附属医院;
摘要：目的 探究海螵蛸含药血清调控PI3K/Akt/eNOS信号通路对高糖诱导血管内皮细胞(HUVECs)增殖、凋亡及血管生成的影响。方法 选取20只SD大鼠，随机对10只大鼠灌胃海螵蛸水煎剂，10只灌胃等量生理盐水，末次给药后2 h制备相应血清。体外培养HUVECs,筛选最佳造模高糖浓度，对细胞诱导24 h,建立高糖损伤模型。根据诱导情况分为空白对照组(Control组)、模型组(Model组)、海螵蛸低剂量组(CLG组)、海螵蛸中剂量组(CMG组)、海螵蛸高剂量组(CHG组),相应血清干预24 h。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况；细胞划痕实验评估各组细胞的迁移能力；流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况；体外成管实验检测各组血管生成情况；采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定各组细胞mRNA表达；采用蛋白免疫印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、人体抑癌基因(p53)蛋白表达情况。结果 高糖诱导内皮细胞损伤的最佳浓度为30 mmol/L;与Control组比较，Model组细胞活性下降，划痕愈合率降低，体外成管数量减少，凋亡率及p53蛋白表达升高，p-PI3K、p-Akt、eNOS蛋白表达降低，PI3K、Akt、eNOS mRNA表达降低，差异均有统计学意义(P<0.05);与Model组对比，CLG、CMG、CHG组细胞存活率上升，划痕愈合率提高，体外成管数量增加，凋亡率及p53蛋白表达下降，p-PI3K、p-Akt、eNOS蛋白表达及PI3K、Akt、eNOS mRNA表达均升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 海螵蛸含药血清可介导PI3K/Akt/eNOS信号通路，从而促进血管内皮细胞的增殖、迁移及血管生成。
关键词：海螵蛸;;高糖;;人脐静脉内皮细胞;;PI3K/Akt/eNOS通路;;增殖;;血管生成
基金资助：国家自然科学基金项目(82360931);; 北海市科学研究与技术开发项目(北科合2023258021);; 广西中医药大学研究生教育创新计划项目(YCBXJ2023036)
