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作者：葛丽娟;刘芯怡;吕雯雯;刘浩然;付强;史慧君;
单位：新疆农业大学动物医学学院;
摘要：为探索紧密连接蛋白OCLN对马疱疹病毒1型(EHV-1)复制的影响，本研究使用CRISPR/Cas9基因编辑技术与慢病毒介导构建OCLN基因稳定敲除和过表达的BHK-21细胞株，采用Western blot检测OCLN敲除和过表达后的蛋白表达情况；使用qPCR、Reed-Muench、Western blot法等检测EHV-1 DNA水平、蛋白表达量、病毒滴度及致细胞病变(CPE)情况等。结果显示：成功构建出OCLN基因敲除的BHK-21细胞株，可显著降低EHV-1 DNA含量、蛋白含量和病毒滴度，阻止EHV-1吸附和内化过程，减弱细胞变圆、脱落等CPE发生；OCLN蛋白过表达后显著增加EHV-1 DNA含量、蛋白含量和病毒滴度，加快EHV-1感染造成的CPE。综上所述，OCLN是EHV-1感染宿主的关键因子之一，在EHV-1感染靶细胞过程中起着重要作用，为建立抗EHV-1的药物作用靶标筛选提供重要的理论基础。
关键词：Occludin;;马疱疹病毒1型;;CRISPR/Cas9;;慢病毒
基金资助：自治区国际合作项目(2020E01006);; 自治区自然基金项目(2022D01E15);; 自治区天山英才项目;; 新疆农业大学大创项目
