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作者：王志悦;李欣蕊;崔子扬;贺志新;孙嘉咛;王许刚;王瑞;李春红;徐明举;张瑞华;徐彤;
单位：河北北方学院预防兽医学重点实验室;河北北方学院第一临床医学院;集宁师范学院计算机与大数据学院;
摘要：本研究以H9N2亚型禽流感病毒RNA为模板，利用RT-PCR获得960 bp的血凝素HA1基因，将其克隆至乳酸菌表达载体pMG36e，构建pMG36e-HA1重组质粒；pMG36e-HA1电转乳酸乳球菌MG1363感受态细胞获得重组乳酸乳球菌MG1363-pMG36e-HA1，应用SDS-PAGE、Western blot鉴定HA1在重组乳酸菌的表达情况；将重组乳酸乳球菌口服免疫10日龄雏鸡，每只鸡口服2×10~9 CFU菌液，共免疫2次；分别在免疫后第7、14天采集血清与气管灌洗液，并检测其抗体与细胞因子水平。结果显示：成功构建出重组乳酸乳球菌MG1363-pMG36e-HA1，且重组乳酸乳球菌成功表达血凝素HA1蛋白，该蛋白能够与H9亚型禽流感阳性血清发生特异性免疫结合反应；雏鸡口服免疫后，其血清与气管灌洗液中抗体与细胞因子水平与对照组相比明显上升。本研究表明，构建的重组乳酸乳球菌MG1363-pMG36e-HA1能够有效刺激免疫应答，口服免疫雏鸡后能够获得良好的免疫效果。
关键词：H9N2禽流感病毒;;血凝素;;乳酸乳球菌
基金资助：河北省科技厅重点研发计划(20326624D);; 河北省高等学校科学技术研究项目(ZD2020314);; 河北省自然科学基金(C2022405010);; 河北省高层次人才资助项目(A202003006);; 河北北方学院校级科研项目(XJ2021008,C2022405017)
