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作者:焦爽;李长尧;张朝霞;翁长江;熊涛;
单位:长江大学生命科学学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;黑龙江省兽医免疫重点实验室;
摘要:本研究利用昆虫杆状病毒表达系统对伪狂犬病病毒(PRV)gB基因中富含抗原表位区段进行融合表达及纯化,并将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠以制备单克隆抗体(mAb)。小鼠经3次免疫后,利用iELISA检测其血清中抗gB蛋白的抗体效价,并将抗体效价达到2×10~4以上的小鼠进行细胞融合。随后通过iELISA和IFA实验对阳性杂交瘤细胞进行筛选。经3~4次亚克隆筛选后,得到了1株可以稳定分泌gB mAb的杂交瘤细胞株293。同时,对其进行亚类鉴定发现该株细胞分泌的抗体类型为IgM型。本研究为建立新型ELISA检测试剂盒、新型疫苗的开发,以及后续中和抗体的研究提供了良好的生物材料。
关键词:伪狂犬病病毒;;gB基因;;昆虫杆状病毒;;单克隆抗体
基金资助:兽医生物技术国家重点实验室课题(SKLVBP202101)