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作者:邓艳;何淑华;黄燕琼;卢嘉贤;戴金;韦浩延;柏建山;
单位:广州白云机场海关综合技术服务中心;广州市花都区动物卫生监督中心;
摘要:为建立南美白对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)的重组酶介导等温扩增(RAA)检测方法,本研究以急性肝胰腺坏死病原菌相关的毒力基因pirA和pirB为检测靶标,设计引物和探针,通过反应条件的优化,建立了恒温荧光RAA检测方法。结果显示:建立的RAA方法仅能扩增出AHPND,与副溶血弧菌、十足目虹彩病毒1(DIV1)等9种水产常见的弧菌和病毒无交叉反应;检测的最低限度可达10 copies/μL,组内变异系数和组间变异系数均小于10%;用该方法对301份样品进行检测,检出27份阳性样品,与荧光定量PCR方法相比总符合率99.3%,与巢氏PCR方法相比总符合率97%。本研究建立了快速、特异、灵敏的RAA检测方法,可以用于AHPND的早期监测和现场快速检测。
关键词:南美白对虾;;急性肝胰腺坏死病;;副溶血弧菌;;重组酶介导等温扩增
基金资助:广东省重点领域研发计划项目(2022B1111030001)