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作者：石帅锋;贾静;郑明政;张倩;洪炀;林矫矫;傅志强;
单位：中国农业科学院上海兽医研究所国家动物血吸虫病参考实验室;中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室;
摘要：为评估日本血吸虫抱雌沟蛋白作为疫苗候选抗原的潜力及其与GEL 02和ISA 201佐剂配伍后的免疫应答，本研究通过构建重组质粒pGEX-4T-1/SjGCP并在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达，纯化融合蛋白rGST-SjGCP，用Western blot检测其抗原性，再将其分别与2种佐剂配伍后免疫小鼠评估其免疫效果，用ELISA检测特异性抗体水平。结果显示：重组质粒pGEX-4T-1/SjGCP在大肠杆菌中成功诱导表达，纯化后得到约100 kDa的融合蛋白rGST-SjGCP；rGST-SjGCP分别与GEL 02和ISA 201佐剂配伍后免疫小鼠，均诱导小鼠产生较高水平的特异性IgG抗体，分别是佐剂对照组的7.07倍(P<0.001)和6.86倍(P<0.001)，特异性抗体亚型IgG1/IgG2a的比值与佐剂对照组相比分别升高了13.68%(P<0.05)和14.71%(P=0.3468)；日本血吸虫感染小鼠血清和融合蛋白rGST-SjGCP免疫小鼠血清均可特异性识别目的蛋白，表明rGST-SjGCP具有良好的抗原性；与PBS组相比，rGST-SjGCP与GEL 02佐剂配伍后在小鼠中诱导了25.87%(P<0.01)的减虫率和27.36%(P<0.05)的肝脏减卵率，rGST-SjGCP与ISA 201佐剂配伍后在小鼠中未诱导产生差异显著的减虫率和肝脏减卵率。结果表明，rGST-SjGCP结合GEL 02佐剂可诱导偏向Th2型免疫应答，具有免疫保护效果。本研究为评价日本血吸虫抱雌沟蛋白作为疫苗候选抗原的潜力及疫苗佐剂的选择提供了依据。
关键词：日本血吸虫;;抱雌沟蛋白;;佐剂;;疫苗
基金资助：国家重点研发计划(2021YFF0702403);; 国家自然科学基金(31872256)
