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中国动物传染病学报2025年第04期:1株猫疱疹病毒Ⅰ型的分离鉴定及其单克隆抗体的制备与应用

来源:期刊VIP网 时间:


作者:王旭贞;周登元;曹龙龙;彭佳佳;李国红;史开拓;张燕;

单位:山西省畜牧兽医学校;武汉科前生物股份有限公司;

摘要:为获得猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)特异性的单克隆抗体,以用于FHV-1的诊断与防控,本研究采集疑似FHV-1感染的患病猫眼鼻咽混合拭子进行PCR鉴定,利用猫肾细胞(F81)对阳性拭子进行病毒分离纯化,并以灭活的FHV-1为抗原免疫BABL/c小鼠,进行单克隆抗体的制备。结果显示:通过接种F81细胞,成功分离纯化1株FHV-1毒株,命名为FHV-WH株,该毒株能够稳定传代且病毒滴度较高;经制备FHV-WH株抗原免疫小鼠,筛选获得3株能够稳定分泌抗FHV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3F3、2D8和4C8;IFA和Western blot检测结果显示3F3株杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能与FHV-1发生特异性结合,其亚型鉴定为IgG1型,轻链属于Kappa型。综上所述,本研究通过FHV-1流行毒株FHV-WH株的分离纯化以及抗FHV-1单克隆抗体的制备,为FHV-1生物学特性研究以及快速准确诊断方法的建立奠定基础。

关键词:猫疱疹病毒;;分离;;单克隆抗体;;制备;;鉴定

基金资助:武汉市科技计划项目(2019020702011378);; 武汉东湖高新区“3551光谷人才计划”;; 湖北省技术创新专项重大项目(2017ABA056)