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病毒学报2024年第04期:一种实验室去除噬菌体制剂内毒素方法的建立

来源:期刊VIP网 时间:


作者:袁文源;林焱;朱伟云;

单位:国家动物消化道营养国际联合研究中心,江苏省消化道营养与动物健康重点实验室,南京农业大学消化道微生物研究室;

摘要:内毒素是革兰氏阴性菌被噬菌体裂解时释放的外膜脂多糖,是噬菌体制剂中的主要污染物,可能引发机体严重免疫反应。因此,去除内毒素对于噬菌体应用非常重要。在本文中,我们采用了透析法、超滤法及两者结合的方法分别去除噬菌体制剂中的内毒素,并检测不同方法处理后噬菌体制剂中内毒素浓度及噬菌体滴度。结果显示,三种方法均能有效去除噬菌体制剂中的内毒素,其中透析法48h去除内毒素的效果最优,去除率达到99.9%以上。此外,超滤法得到的噬菌体回收率显著低于透析法,且每噬菌斑形成单位内毒素含量更高。超滤和透析结合的方法能在牺牲部分回收率的情况下节省时间,且内毒素去除率也能达到99%以上。综上,本文建立了一种通过透析去除噬菌体制剂内毒素的方法,与传统超滤法相比,具有操作简便、成本低、回收率高的优点,可以作为实验室去除噬菌体制剂内毒素的可行方法。

关键词:噬菌体;内毒素;透析;超滤

基金资助:国家自然科学基金(项目号:31802102),题目:仔猪肠道黏膜ETEC噬菌体保护肠道黏膜屏障功能及其定植肠黏膜的机制研究; 国家重点研发计划子课题(项目号:2022YFD1600904-3),题目:藏猪饲料营养关键技术研究与示范~~