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作者:徐瑞敏;邵化;李晨飞;单明明;魏涛;
单位:郑州轻工业大学食品与生物工程学院;
摘要:为提升芳香族氨基酸转氨酶(AAT)在合成生长素、促进作物生长方面的潜在应用价值,采用生物信息学方法对烟草肠杆菌β7(Enterobacter tabaci strain β7)AAT的结构进行分析和预测,利用大肠杆菌对该酶进行异源克隆表达和纯化,并测定重组AAT的酶学性质。结果表明:AAT含有396个氨基酸,该酶活性中心关键氨基酸残基为Lys246;由大肠杆菌异源表达的重组AAT的分子质量约为43 kDa,其最适底物为色氨酸,最适反应温度为50℃、pH值为8.0;重组AAT对乙醇具有较好的耐受性,且Cu~(2+)对该酶活性有一定的促进作用。该研究结果可为烟草肠杆菌AAT的酶分子改造和高产生长素工程菌的构建提供理论基础。
关键词:烟草肠杆菌;;芳香族氨基酸转氨酶;;生长素;;结构预测;;克隆表达;;酶学性质
基金资助:中原科技创新人才项目(224200510017);; 河南省重点研发专项项目(231111111700)