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作者:徐智博;姜鑫淼;甄雨琦;白玛曲珍;孙梦瑶;孟秀萍;
单位:吉林大学口腔医院牙体牙髓科;吉林省牙发育及颌骨重塑与再生重点实验室;
摘要:目的:探讨长期使用氯己定对粪肠球菌(E. faecalis)耐药性的影响,并阐明其作用机制。方法:将E. faecalis标准菌株反复暴露于氯己定中传代10代,记录每一次传代时的最低抑菌浓度(MIC)值。收集第10代且MIC值增加的细菌,即为E. faecalis氯己定耐药菌株(E. faecalis-Cs)。绘制2种菌株生长曲线,透射电子显微镜观察2种菌株形态表现,结晶紫染色法检测2种菌株细菌生物膜形成量,微生物黏着碳氢化合物(MATH)法检测2种菌株细菌疏水率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2种菌株细菌生物膜中S-核糖基高半胱氨酸裂解酶(LuxS)mRNA表达水平。结果:随着传代次数(第0~10代)的增加,E. faecalis的MIC值逐渐升高。E. faecalis和E. faecalis-Cs的生长曲线无明显差异。透射电镜,E. faecalis和E. faecalis-Cs均呈椭圆形或双球型,细胞壁结构完整,边缘光滑,细胞质分布均匀,2种细菌形态大小和细胞壁厚度及完整性方面无明显差异。结晶紫染色法,与E. faecalis比较,E. faecalis-Cs生物膜形成量明显增加(P<0.05)。MATH法,与E. faecalis比较,E. faecalis-Cs的细菌疏水率明显升高(P<0.05)。RT-qPCR法,与E. faecalis比较,E. faecalis-Cs细菌生物膜中LuxS mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:E. faecalis在反复暴露于氯己定后会产生耐药性,耐药菌株致病能力增强。群体感应(QS)系统LuxS基因高表达和更强的细菌生物膜形成能力可能是E. faecalis对氯己定产生耐药性的潜在机制。
关键词:粪肠球菌;;氯己定;;耐药性;;粪肠球菌氯己定耐药菌株;;群体感应系统
基金资助:吉林省财政厅科技项目(JCSZ2021893-23)