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中药材2024年第11期:甘松倍半萜合成酶基因的克隆及表达分析

来源:期刊VIP网 时间:


作者:郝志禹;唐小慧;胡月莹;周妍汛;彭燕妮;裴瑾;陈江;

单位:成都中医药大学/西南特色中药资源国家重点实验室;四川省草原科学研究院;

摘要:目的:筛选甘松倍半萜合成酶候选基因并进行克隆和表达分析,为后期解析甘松品质形成的分子机制提供依据。方法:根据转录组测序信息设计引物,利用PCR技术从cDNA文库中克隆,使用在线软件对候选倍半萜合成酶基因进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR检测候选基因在甘松不同部位组织中的差异表达。结果:克隆获得7个倍半萜合成酶候选基因(命名为NjTPS1、NjTPS2及NjTPS4~8),均含有萜类骨架形成的关键酶(TPS)基因家族的结构。克隆所得7个基因与模式植物拟南芥的萜类合成酶基因家族系统发育的分析结果表明,TPS1、TPS2、TPS4与TPS5于拟南芥相关基因的关系较近。在实时荧光定量PCR检测中,TPS1、TPS2、TPS4、TPS7均在根中的表达量最高,在其他组织中的表达量相对较低;TPS5在根中的表达量最高,而在叶和花中未表达;TPS6、TPS8在茎中的表达量最高,在其他组织中表达量较低。结论:该研究获得7个与甘松倍半萜合成的相关基因信息和表达特征,为后续深入开展甘松倍半萜合成酶调控机制的研究奠定了基础。

关键词:甘松;;倍半萜合酶;;转录因子;;基因表达;;生物信息学

基金资助:国家自然科学基金项目(82274039);; 四川省自然科学基金项目(2023NSFSC0660);; 四川省“十四五”农作物及畜禽育种攻关项目(2021YFYZ0012-5);; 云南省科技计划项目(202304BI090020);; 国家中医药多学科交叉创新团队项目(ZYYCXTD-D-202209)