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作者:王思云;柯斌;陈晓菲;许迎景;师林;
单位:南方医科大学珠江医院中医科;中山大学肿瘤防治中心中医科;广州市增城区中医医院肿瘤科;中山大学孙逸仙纪念医院;
摘要:目的:观察加味龟鹿二仙胶汤含药血清调控MAPKAP1介导的mTORC2/AKT信号通路抑制A549细胞血管拟态形成的作用。方法:采用中药水煎剂灌胃,心脏采血,制备加味龟鹿二仙胶汤含药血清;CCK-8检测A549细胞增殖;Annexin V-FITC/PI染色及流式细胞仪检测A549细胞凋亡;划痕实验检测A549细胞迁移、Transwell实验检测A549细胞侵袭;体外成管实验检测A549血管拟态形成;荧光定量PCR检测MAPKAP1、VEGF mRNA表达;蛋白印迹法检测mTORC2/AKT信号通路相关蛋白及VEGF蛋白表达。结果:结合CCK-8及流式细胞分析结果确定以5%、7.5%、12.5%为加味龟鹿二仙胶汤含药血清的低、中、高浓度。与对照组比较,各浓度加味龟鹿二仙胶汤含药血清能不同程度抑制A549细胞迁移、侵袭、血管拟态形成,并下调MAPKAP1、VEGF mRNA及蛋白表达,降低S6、mTOR、RICTOR、AKT-308、AKT-473蛋白磷酸化水平。结论:加味龟鹿二仙胶汤含药血清可通过抑制MAPKAP1表达阻断mTORC2/AKT通路下调VEGF表达拮抗A549细胞血管拟态形成。
关键词:肺癌;;加味龟鹿二仙胶汤;;VEGF;;MAPKAP1/mTORC2/AKT信号通路;;血管拟态形成
基金资助:国家自然科学基金项目(82074159);; 广东省自然科学基金项目(2021A1515011611);; 广东省医学科学技术研究基金项目(C2022062)