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作者:贾阿韶;范晓怡;刘菊珍;黄云祖;赵径玄;余广超;
单位:深圳大学总医院检验科;暨南大学附属第一医院检验科;广州中医药大学顺德医院检验科;
摘要:目的 研究高毒力肺炎克雷伯菌(HvKP)的毒力基因与耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药基因的横向转移机制及其遗传演化特征。方法 供体菌为1株同时含VIM、KPC耐药基因的CRKP,阳性对照菌为1株含bla_(IMP-4)CRKP,受体菌为大肠埃希菌J53,通过质粒接合实验验证耐药基因的水平转移能力。收集暨南大学附属第一医院2017-2021年50株HvKP菌株,将50株HvKP菌株与具有介导耐药基因传播能力的5株CRKP菌株进行质粒接合试验,通过含有美罗培南抗菌药物的选择性培养基筛选质粒接合成功的接合菌,采用聚合酶链式反应(PCR)检测接合菌的耐药基因和毒力基因,通过大蜡螟幼虫实验验证接合菌的致死性。结果 供体菌CRKP具有介导耐药基因传播的能力,其携带的bla_(KPC)基因成功转移至大肠埃希菌J53(但VIM基因转移失败),即共筛选到5株具有介导耐药基因传播能力的CRKP菌,其中1株携带VIM、KPC耐药基因,另外4株均携带IMP-4耐药基因;只有1株含bla_(IMP-4)耐药基因的CRKP与HvKP菌接合成功,接合菌同时含有毒力基因(aerobactin和RmpA)和耐药基因bla_(IMP-4),且拉丝实验阳性。大蜡螟幼虫实验显示接合菌在24 h内导致全部幼虫死亡。结论 医院环境中,CRKP与HvKP可通过质粒接合形成兼具耐药性和高毒力的“超级细菌”,对临床抗感染治疗构成严峻挑战,需加强院感防控。
关键词:肺炎克雷伯菌;;毒力基因;;耐药基因;;质粒接合实验;;传播
基金资助:广东省中医药局科研项目(20231089)