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作者：刘思雨;赵硕;欧阳康;何颖;卢冰霞;赵武;段群棚;许心婷;全琛宇;许艺兰;李斌;程珂;秦毅斌;
单位：广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室农业农村部中国(广西)-东盟跨境动物疫病防控重点实验室;广西大学动物科学技术学院广西高校动物疫病预防与控制重点实验室广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心;广西农垦永新畜牧集团有限公司;
摘要：为探究猪丁型冠状病毒（PDCoV）非结构蛋白NSP9和NSP16对宿主细胞Ⅰ型干扰素（IFN-Ⅰ）的调控作用，在293T细胞中过表达NSP9、NSP16，通过双荧光素酶报告系统和qRT-PCR评估NSP9、NSP16对仙台病毒（Se V）诱导产生的IFN-β的影响，再通过q RT-PCR、Western-blot检测NSP9、NSP16对RIG-Ⅰ样受体（RLRs）信号通路的影响。结果显示，NSP9、NSP16能显著抑制和降低Se V诱导的IFN-β启动子活性、IFN-β与干扰素刺激基因15(ISG15)的转录水平。同时，过表达NSP9可以显著降低RLRs信号通路中视黄酸诱导基因Ⅰ（RIG-Ⅰ）、黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、TANK结合激酶1(TBK1)和干扰素调节因子3(IRF3)的转录水平，并显著抑制RIG-Ⅰ、MDA5、线粒体抗病毒信号蛋白（MAVS）和TBK1的表达；而过表达NSP16可以显著降低RIG-Ⅰ和MDA5的转录水平，并显著抑制RIG-Ⅰ的表达和IRF3的磷酸化。结果表明，PDCoV的非结构蛋白NSP9和NSP16可能通过调控RLRs信号通路来抑制IFN-Ⅰ产生，为阐明PDCoV的致病机制、寻找新的治疗靶点、开发新型抗病毒药物奠定了理论基础。
关键词：猪丁型冠状病毒;;NSP9蛋白;;NSP16蛋白;;Ⅰ型干扰素
基金资助：国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设专项（nycytxgxcxtd-2023-15-02）;; 南宁市科技重大专项（20232039）;; 广西基本科研业务费专项（桂科专项23-3/22-4/22-3/24-7/24-3/24-11）;; 广西兽医生物技术重点实验室开放基金项目（22-035-32-B-02,23-035-32-B-02,23-035-32-B-01）;; 广西农业科技自筹经费项目（Z2023034,Z202225）;; 广西桂垦牧业科学研究与技术开发项目（桂垦牧科20220
