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作者：黄鹤;李佳明;张玲珑;刘雪威;李焕荣;董虹;王建舫;周双海;
单位：北京农学院动物科技学院;北京农学院兽医学(中医药)北京市重点实验室;
摘要：本研究旨在基于体外试验和网络药理学方法探究中药虎杖抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的作用和潜在活性成分与机制。首先制备虎杖水提液，用CCK-8法在Marc-145细胞上测定其细胞毒性，用RT-qPCR、Western-blot及间接免疫荧光试验（IFA）分别测定不同时间和不同剂量的虎杖水提液对PRRSV增殖的抑制作用。然后用TCMSP数据库筛选虎杖的活性成分及对应靶点，用GeneCards数据库筛选PRRSV疾病靶点，进而筛选虎杖和PRRSV疾病的交集靶点，将得到的交集靶点构建蛋白质互作网络并进行GO功能与KEGG富集分析。最后对筛选出的主要活性成分与核心靶点进行分子对接验证。体外试验结果显示，最大安全浓度的虎杖水提液在PRRSV感染后第24、36、48小时均显著抑制病毒增殖，高、中剂量的虎杖水提液均可抑制PRRSV增殖并呈现剂量依赖性。网络药理学结果显示，虎杖有11种活性成分，可作用于212个抗PRRSV靶点。GO功能富集分析得到1 383个条目，KEGG通路富集分析得到179条信号通路。分子对接显示，虎杖主要活性成分白藜芦醇、槲皮素和木犀草素均能够与白介素6(IL-6)、丝氨酸/苏氨酸激酶（AKT1）、肿瘤坏死因子（TNF）、白介素1β(IL-1β)、肿瘤蛋白P53(TP53)及AP-1转录因子亚单位（JUN）等核心靶点实现良好结合。研究结果表明，虎杖可能通过白藜芦醇、槲皮素和木犀草素等活性成分作用于IL-6、AKT1、TNF、IL-1β、P53、JUN等靶点而发挥抗PRRSV作用。
关键词：虎杖;;猪繁殖与呼吸综合征病毒;;网络药理学;;分子对接
基金资助：北京市家畜创新团队项目（BAIC05-2023）
