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中国兽医科学2025年第01期:基于猪流行性腹泻病毒S蛋白单克隆抗体的竞争ELISA方法的建立

来源:期刊VIP网 时间:


作者:柴茂;马震原;杨海波;王淑娟;赵雪丽;刘影;王东方;王翠;谢彩华;闫若潜;

单位:河南省动物疫病预防控制中心河南省重大动物疫病监测预警及防控重点实验室;

摘要:为建立基于猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白单克隆抗体的竞争ELISA方法,利用真核表达系统表达PEDV S蛋白主要抗原区,将纯化的S蛋白免疫小鼠后制备抗PEDV S蛋白的单克隆抗体,经各组分和反应条件优化,建立了检测PEDV S蛋白抗体的竞争ELISA方法。结果表明,表达的S蛋白大小为92 k Da,制备出IgG1亚类的抗S蛋白单克隆抗体5B3D6,建立的竞争ELISA方法 S/N临界值为0.400,样品检测时间短(55 min),重复性稳定(变异系数小于10%),特异性强(无交叉反应),与血清中和试验的总符合率高(97.08%)。该方法为PEDV抗体评估和猪流行性腹泻防控提供了有力支撑。

关键词:猪流行性腹泻病毒;;S蛋白;;单克隆抗体;;竞争ELISA

基金资助:河南省重点研发与推广专项(232102110085,232102110089,232102111053);; 河南省重点研发专项(231111111300);; 河南省重大科技专项(221100110600);; 河南省现代农业产业技术体系专项(HARS-22-12-T)