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作者：戴贝凝;周贝怡;周琳怡;蓝小媛;王如嘉;张倩倩;周建卫;
单位：扬州大学兽医学院(比较医学研究院);扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;
摘要：以合成的猪圆环病毒4型（PCV4）全基因组为模板，PCR扩增PCV4 Cap和dCap基因序列，并将其克隆至原核表达载体p ET-28a中，得到重组质粒p ET-28a-PCV4-Cap和pET-28a-PCV4-dCap。经酶切和测序鉴定后，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21感受态细胞，经IPTG诱导，成功表达了约28 kDa的融合蛋白His-PCV4-dCap，通过镍离子亲和层析法纯化His-PCV4-dCap融合蛋白，皮下多点注射免疫BALB/c小鼠，经3次免疫后获得PCV4 Cap蛋白多克隆抗体。Western-blotting和间接免疫荧光（IFA）结果显示，本研究制备的PCV4Cap蛋白多克隆抗体与原核以及真核表达的PCV4Cap蛋白均具有良好的反应性，为建立PCV4检测方法以及研究PCV4 Cap蛋白功能，揭示PCV4感染及致病机制奠定了基础。
关键词：猪圆环病毒4型;;衣壳蛋白;;原核表达;;多克隆抗体
基金资助：“十四五”重点研发项目课题（2022YFD1800303）;; 江苏省基础研究计划（自然科学基金）（BK20210807）;; 江苏高校优势学科建设工程资助项目（PAPD）;; 扬州大学大学生科创基金项目（X20220681＿2022）
