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作者：刘立兵;王金凤;李睿文;张晓利;孙晓霞;王建昌;
单位：石家庄海关技术中心;河北农业大学动物医学院;唐山市动物检疫站;
摘要：为实现对牛呼吸道疫病综合征（bovinerespiratorydiseasecomplex,BRDC）16种常见病原的同时检测，本研究成功建立了一种实时荧光PCR检测平台。该检测平台具有较强的特异性，16种BRDC病原之间无交叉反应；以含有特异性靶基因的标准品质粒DNA或基因组DNA为模板，不同病原的检出限在1.0×102～1.0×100copies/μL或1.0～0.1pg/μL之间，且具有良好的重复性。应用该检测平台对河北地区的290份临床样品进行检测。结果显示，16种BRDC病原均有检出，其中牛冠状病毒、睡眠嗜组织菌、牛疱疹病毒1型、溶血曼氏杆菌、多杀巴氏杆菌和牛鼻炎病毒B型检出率较高，分别为28.62%(83/290)、24.48%(71/290)、21.37%(62/290)、19.31%(56/290)、16.55%(48/290)和16.20%(47/290)。进一步分析表明，同一阳性样本中BRDC病原多重感染的现象普遍存在，以双重感染最为严重，检出率高达31.38%(91/290)；三重感染和四重感染的检出率分别为15.52%(45/290)和5.17%(15/290)；也存在一定比例的五重、六重和七重感染。本研究建立的BRDC常见病原实时荧光PCR检测平台能够在相同反应体系和反应条件下，实现对16种BRDC常见病原的同时检测。该检测平台具有操作方便、检测通量高等优点，可为进境种牛隔离场和国内养牛场中BRDC常见病原的快速检测和监测提供有力的技术支持。
关键词：牛呼吸道疫病综合征;;实时荧光PCR;;检测平台;;多重感染
基金资助：海关总署科研项目（2023HK035）
