来源：期刊VIP网 时间：
作者：王一卓;范许许;朱兆宇;裴丹诗;何路;李熙忠;任青峰;郑海学;朱紫祥;李伟伟;蒋大伟;
单位：河南农业大学动物医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室国家口蹄疫参考实验室;甘肃农业大学生命科学技术学院;
摘要：旨在探究宿主因子LULL1对口蹄疫病毒（FMDV）复制的影响，为阐明病毒-宿主相互作用机制提供新的见解。首先利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建LU LL1基因敲除细胞系PK-15-LULL1-KO，之后用CCK8试剂盒检测细胞活力，发现LULL1敲除对细胞活力无明显影响。为比较PK-15-LULL1-KO与野生型PK-15细胞对FMDV复制的影响，通过实时荧光定量PCR检测FMDV mRNA的转录水平，通过Westernblot检测FMDV非结构蛋白2C的表达，通过TCID50技术检测上清中病毒滴度变化，结果表明敲除LU LL1基因能显著抑制FMDV的复制。为进一步探究LULL1的表型功能，利用慢病毒包装系统构建LU LL1基因过表达PK-15细胞系，与野生型PK-15细胞相比，LULL1过表达能显著促进FMDV的复制。本研究成功构建了LU LL1基因敲除和过表达细胞系，将为进一步阐明LULL1促进FMDV复制及调控FMDV复制机制提供理论依据。
关键词：口蹄疫病毒;;LULL1;;细胞系;;非结构蛋白2C
基金资助：国家重点研发计划项目（2021YFD1800302）;; 国家自然科学基金青年项目（32302857,32202781）;国家自然科学基金重点项目（32330107）;; 中国博士后科学基金项目（2023M743830）;; 国家生猪产业技术体系项目（CARS-35,CARS-39-13）;; 吉林大学人兽共患病研究教育部重点实验室资助项目（2023iz001）;; 国家生猪技术创新中心先导科技项目（NCTIP-XD/C03）;; 中国农业科学院创新计划项目（CAAS-CSLPDCP-20230
