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作者:陶然;胡屹屹;邓慧;程曦;韩楠;卞贤宇;王建新;周金柱;朱雪蛟;张雪寒;李彬;
单位:江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室;
摘要:体外筛选对猪轮状病毒(PoRV)有抗病毒作用的中药活性成分,为抗PoRV药物开发和临床防控提供理论依据。从6种中药活性成分中筛选到具有潜在抗PoRV作用的柴胡皂苷A (SSA),采用CCK8方法筛选了SSA在IPEC-J2细胞上药物安全浓度,然后用不同浓度的SSA处理PoRV感染的细胞,通过荧光定量PCR、TCID50及Western-blot实验技术分析SSA对PoRV (NJ2012株、G9P [7]型)增殖的影响;接着从病毒的吸附、入侵、复制及释放等阶段,分析了SSA对PoRV复制阶段的影响;最后通过荧光定量PCR和TCID50实验分析了SSA对不同基因型PoRV (G9P [23]型、G1P [7]型和G4P [23]型)、猴源RV及牛源RV增殖的影响。结果显示,SSA在120μg/mL浓度范围内对IPEC-J2细胞均无明显的毒性作用,SSA分别在20、40、80μg/mL处理浓度下,对Po RV呈现剂量依赖性抗病毒作用;SSA在PoRV复制阶段发挥抗病毒作用,对病毒的吸附、入侵及释放阶段均无明显影响;SSA对不同基因型PoRV、猴源RV及牛源RV均具有不同程度的抗病毒作用。综上,本研究发现SSA具有较好的体外抑制PoRV增殖的作用,且作用于病毒的复制阶段,进一步研究发现SSA对其他不同种属和基因型的RV也具有一定抗病毒作用,初步表明SSA具有潜在的广谱抗RV作用。该研究为开发抗RV药物和临床防控PoRV感染流行提供了一定的理论指导。
关键词:柴胡皂苷A;;猪轮状病毒;;中药;;抗病毒
基金资助:国家自然科学基金项目(32302892);; 江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(23)1029];; 江苏省重点研发计划(现代农业)项目(BE2023317)