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作者：郑东东;齐晓兰;杨彪;晏子龙;郑海学;冯涛;徐红伟;
单位：西北民族大学生命科学与工程学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;甘肃省病原生物学基础学科研究中心;
摘要：基因组编辑工具在抗病研究中具有巨大潜力。本研究旨在探究CRISPR/Cas13d系统在体外抗口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease vir,uFsMDV）研究的可行性。首先，靶向FMDV非结构蛋白3B和3Cpro的基因序列设计了2条向导RNA (guide RNA,g RNA)，并将其构建到Cas13d表达载体中；通过脂质体将表达载体转染到BHK21细胞中，再通过嘌呤霉素筛选，获得了转基因细胞系。随后，利用RT-qPCR、Western-blot以及TCID50等试验检测FMDV在转基因细胞系中的复制情况。结果显示，CRISPR/Cas13d系统显著抑制了FMDV在BHK21细胞中的复制。提示，CRISPR/Cas13d系统在口蹄疫病毒抗病研究中发挥重要作用，同时为创制具有抗病特性的家畜新品种提供了重要的理论基础，为畜禽疫病的防控提供了新的途径。
关键词：口蹄疫病毒;;CRISPR/Cas13d;;家畜抗病;;转基因
基金资助：“十四五”广东省揭榜挂帅项目（2024KJ14）;; 科技创新2030重大项目（2023ZD0404301）;; 甘肃省联合科研基金重点项目（23JRRA1478）;; 兰州市科技计划项目（2024-8-12）;; 国家自然科学基金重点项目（32330107）;; 国家重点研发计划项目（2021YFD1800300）;; 中央高校基本科研业务费专项资金资助（lzujbk-y2022-ct02）;; 国家生猪技术创新中心项目（NCTIP-XD/C03）;; 家畜重要疫病诊断研制与产业化项目（22Z
