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作者：马鑫淇;杜晓悦;段续接;张培;陈思旭;刘淑英;
单位：内蒙古农业大学兽医学院;农业农村部动物临床诊疗技术重点实验室;内蒙古自治区基础兽医学重点实验室;
摘要：为了筛选内源性绵羊肺腺瘤病毒（enJSRV）长末端重复序列（LTR）转录调控的元件，本研究利用同源重组技术以本实验室保存的pGL4.10/enJSRV LTR为模板构建enJSRV LTR截短突变质粒，利用双荧光素酶报告基因系统筛选出enJSRV LTR启动子核心区域，通过生物信息学软件预测enJSRV LTR启动子核心区域潜在转录因子结合位点并构建其真核表达质粒，利用双荧光素酶报告基因系统分别检测其对enJSRV LTR启动子活性的影响。测序结果表明，pGL4.10/enJSRV LTR截短突变质粒构建成功；荧光素酶活性检测结果表明，p GL4.10/enJSRV LTR在-118 bp～-44 bp区域启动子活性显著下降（P<0.001）；提示该区域存在LTR启动子正调控元件；Flag/SOX17、Flag/EZH2、Flag/FOXM1、Flag/ZNF143真核表达质粒构建成功，其中，过表达SOX17可显著提高enJSRV LTR的启动子活性（P<0.001）。上述结果表明，本研究鉴定了enJSRV LTR核心启动子区域，并确定转录因子SOX17可直接促进enJSRV LTR转录。这些发现为enJSRV转录调控的分子机制研究提供了依据，并促进了JSRV研究领域的深入研究。
关键词：内源性绵羊肺腺瘤病毒;;长末端重复序列;;双荧光素酶报告基因系统;;SOX17
基金资助：国家自然科学基金项目（32072819,32360863）;; 内蒙古科技重大专项计划资助项目（2021ZD0010）;; 内蒙古草原英才创新团队项目（20151031）;; 牛羊疫病防控与发育工程创新团队资助项目（BR22-13-08）;; 兽医基础与牛羊疫病防控技术研发创新团队项目（NMGIRT2412）;; 研究生科研创新资助项目（B20231072Z）;; 内蒙古自治区教育厅一流学科科研专项（YLXKZX-NND-012）
