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作者:裴丹诗;范许许;朱兆宇;王一卓;何路;任青峰;李熙忠;郑海学;李伟伟;万博;
单位:河南农业大学动物医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室;
摘要:本研究旨在探究宿主蛋白TRIM3对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。利用CRISPR/Cas9系统构建了TRIM3基因敲除的BHK21细胞系,并借助CCK8试剂盒检测了该基因的缺失对细胞活力的影响,结果表明,TRIM3敲除对细胞生长状态无明显影响。将FMDV分别感染野生型和TRIM3敲除型的BHK21细胞,通过Q-PCR、Western-blot和TCID50等多种方法检测FMDV在上述2株细胞中的复制情况,结果表明,TRIM3缺失能够显著抑制FMDV的复制。为了进一步验证TRIM3的表型功能,用慢病毒包装系统构建了TRIM3过表达细胞系。结果显示,过量表达TRIM3能够促进FMDV的复制。综上所述,本研究通过CRISPR/Cas9系统成功构建了TRIM3基因敲除细胞系和过表达细胞系,首次证明了TRIM3能够正向调控FMDV的复制,为后续探究TRIM3调控FMDV复制的具体机制奠定了基础。
关键词:TRIM3;;口蹄疫病毒;;细胞系
基金资助:国家自然科学基金青年项目(32202781,32302857);国家自然科学基金重点项目(32330107);; 国家重点研发计划项目(2021YFD1800300);; 中国博士后科学基金项目(2023M743830);; 国家生猪产业技术体系项目(CARS-35,CARS-39-13);; 国家生猪技术创新中心先导科技项目(NCTIP-XD/C03);; 中国农业科学院创新计划项目(CAASCSLPDCP-2023002,CAAS-ASTIP-2023-LVRI);; “十四五”广东省农业科