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作者：盛陈艳;麻宝艺;李健明;宫庆龙;刘菲;时坤;孙志博;刘艺;冷雪;杜锐;
单位：吉林农业大学动物科学技术学院;吉林农业大学中药材学院;吉林农业科技学院;动物生产及产品质量安全教育部重点实验室;吉林省梅花鹿高效养殖和产品开发技术工程研究中心;
摘要：为快速检测水貂圆环病毒(MiCV)，本试验根据MiCV Cap基因序列设计合成特异性引物，建立了水貂圆环病毒SYBR Green II实时荧光定量PCR检测方法。结果显示，该方法在模板浓度为1.0×10~6 ～1.0×10~1 copies/μL范围内呈良好线性关系，相关系数为0.9983。本试验建立的检测方法对水貂阿留申病毒、猪圆环病毒2型、水貂肠炎病毒、犬瘟热病毒和猪伪狂犬病毒进行检测均无特异性扩增，批内和批间CV均小于2%，对重组阳性质粒的检测下限为1.0×10~1 copies/μL，比普通PCR的敏感度高100倍，对阳性样品DNA的检测下限为2.38×10~(-2) pg/μL，比普通PCR的敏感度高1000倍。应用该方法对吉林省部分毛皮动物养殖场的水貂、狐狸、貉和环境样品进行检测，结果其阳性率分别为57.23%、48.42%、39.71%和68.48%。上述结果表明，本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性，为MiCV的诊断及流行病学调查提供技术支持。
关键词：水貂圆环病毒;;Cap基因;;SYBR Green II实时荧光定量PCR方法
基金资助：吉林省科技发展计划项目(20190304004YY)
