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中国动物传染病学报2024年第02期:A型塞内卡病毒VP1蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

来源:期刊VIP网 时间:


作者:秦文珍;李挺;赵欣;董苏洁;翟焕杰;叶晨倩;叶曼青;童武;郑浩;于海;单同领;童光志;兰道亮;孔宁;

单位:西南民族大学畜牧兽医学院;中国农业科学院上海兽医研究所;

摘要:A型塞内卡病毒(SVA)是一种新兴的猪病原体,可引起母猪水泡样病变和仔猪急性死亡。本研究将SVA的VP1基因分别克隆到原核表达载体pCold-I和pCold-TF,并将测序正确的重组质粒VP1-pCold-I、VP1-pCold-TF转化BL21(DE3)大肠杆菌中,诱导表达重组蛋白。结果显示:VP1-pCold-I表达的目的蛋白在沉淀(包涵体)中,VP1-pCold-TF表达的蛋白为可溶性蛋白。分别纯化上述表达的蛋白,并免疫BALB/c小鼠,经四次免疫后得到多克隆抗体。经Western blot和间接免疫荧光(IFA)鉴定,制备的多克隆抗体具有良好的Western blot效价和IFA效价,为相关基础研究和应用研究提供了工具。

关键词:A型塞内卡病毒;;VP1;;原核表达;;多克隆抗体

基金资助:西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目(2020YYXS70)