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作者：赵雪丽;闫若潜;王华俊;王淑娟;马震原;谢彩华;柴茂;杨海波;王翠;刘影;王东方;
单位：河南省动物疫病预防控制中心河南省重大动物疫病监测预警及防控重点实验室;
摘要：建立一种快速、特异鉴别检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重TaqMan MGB探针FQ-PCR方法，本研究以PCV2的Rep蛋白和PCV3的Cap蛋白基因作为靶基因，各设计1对特异性引物和1条TaqMan MGB探针，经优化各反应条件和进行敏感性、特异性、重复性和干扰性试验，建立鉴别检测PCV2/PCV3的双重FQ-PCR方法。结果显示：该方法可特异性扩增PCV2、PCV3核酸，与猪伪狂犬病病毒(PRV)等8种病原及阴性对照无交叉反应，特异性较强；对PCV2和PCV3阳性质粒标准品的最低检出限均可达10 copies/μL，敏感性较高；PCV2/PCV3批内/批间重复试验变异系数(CV)值均在3%以下，表明方法稳定性、重复性较好；干扰性试验表明在两种病毒阳性质粒起始模板相差较大时该方法不会影响对其中任一病毒核酸的检出和准确定量。对42份临床疑似PCV感染样品检测结果与PCV2 、PCV3基因测序结果符合率100%。本研究建立的双重FQ-PCR方法具有敏感性高达10 copies/μL、特异性强、在同一反应体系中能同时快速鉴别检测PCV2、PCV3等优点，可用于临床PCV2/PCV3感染的快速鉴别检测。
关键词：猪圆环病毒2型;;rep基因;;猪圆环病毒3型;;cap基因;;双重TaqMan MGB FQ-PCR
基金资助：2022年度河南省重大科技专项(221100110600);; 2023年河南省重点研发专项(231111111300);; 河南省现代农业产业技术体系(HARS-22-12-T)
