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作者：杜楠楠;陈金霞;曹云雷;张宽;童武;李丽薇;赵冉;童光志;高飞;
单位：中国农业科学院上海兽医研究所;扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心;厦门市动物疫病预防控制中心;
摘要：本研究利用PCR方法从非洲猪瘟病毒的灭活样品中扩增出747 bp的E248R基因全长序列，利用同源重组法构建原核表达质粒pCold I-pE248R，经1 mmol/L的IPTG诱导1 h后，利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析，表达蛋白的分子量约为32 kDa，利用纯化后得到pE248R重组蛋白作为免疫原经过4次免疫后制备鼠源抗pE248R多克隆抗体。利用该多克隆抗体检测实验室构建并拯救的已证明能够稳定表达ASFV pE248R蛋白的重组病毒rPRRSV-E248R，结果显示制备的抗pE248R的多克隆抗体能够与rPRRSV-E248R发生特异性结合反应，证明利用本试验中原核表达的pE248R蛋白制备的多克隆抗体具有抗pE248R蛋白的特异性，为进一步针对ASFV E248R基因建立快速，特异性的血清学检测方法奠定了基础，也为针对pE248R蛋白的功能性研究提供了研究基础。
关键词：非洲猪瘟病毒;;E248R基因;;pE248R蛋白;;多克隆抗体
基金资助：国家自然科学基金ASFV专项(31941017);; 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(Y2020YJ15);; 广东省重点领域研发计划项目(2019B020211003)
