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作者:李桐;赵润泽;李博天;李春琪;王妍;郭利伟;杨小林;刘国平;
单位:长江大学;
摘要:为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示:该方法特异性好,可鉴别 PCV2、PCV3与其他猪病病毒;PCV2最低检测下限为1.00×10~1 copies/μL,PCV3最低检测下限为1.00×10~0 copies/μL;重复性高,批内、批间的变异系数分别为0.01%~0.02%和0.02%~0.05%;本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份,PCV2样品符合率为97.47%,PCV3样品符合率为96.85%;测序结果显示,PCV2均为2d亚型,PCV3均为3c亚型。结果表明,建立的双重TaqMan荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确,节约成本,可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。
关键词:PCV2;;PCV3;;双重TaqMan qPCR方法建立;;混合感染
基金资助:荆州市2022年度自然科学研究专项(202254-07CC);; 石首市先行县“先进技术集成示范基地建设与定向攻关”揭榜项目(SS202311);; 生猪健康养殖省部共建协同创新中心创新平台项目(2019H2209)